“新”荧光解决“真”问题

病原真菌的诊断一直是临床检查中的一项难题,由于其独特的细胞结构,并且早期感染无明显症状,导致其在检验诊断中有一定困难，而由真菌感染所导致的疾病死亡率也逐渐上升，如何对病原真菌进行快速检测对病原真菌感染的治疗有着重要意义。

目前真菌的检测方法有：涂片镜检、真菌培养、分子生物学、特异性标志物和抗体检测，而培养法是真菌鉴定分类的金标准，但其培养周期长、诊断滞后，对实验室人员有特殊要求。

近期，江西省胸科医院病理科引进了新近发展的真菌免疫荧光染色诊断项目。它是一种新型的染色技术，其染色液中的荧光增白剂是一种荧光染料，与多种植物以及真菌细胞壁的几丁质和纤维素均具有较强的亲和力，在特定的紫外光下(350~400 nm)能够发出亮蓝色荧光，通过荧光显微镜观察其形态可达到检测真菌的目的。

真菌荧光染色诊断的优势在于，真菌结构在荧光显微镜下发出特殊的荧光而易于寻找、辨认，缩短了标本镜检时间，达到快速诊断的目的。有文献报道荧光染色可使标本镜检时间缩短到30-60秒，10%KOH湿片平均镜检时间为3分钟。

最近病理科接到了一例手术病例，该病例快速诊断就受益于此项目的开展。患者于12月16日行右上肺部分切除术，并行术中快速冰冻检查，标本送至病理科，经过标本核对--登记--记录--取材--切片--染色--诊断等常规操作程序，科主任刘翼军镜下观察诊断考虑肉芽肿性炎，部分组织细胞内可见少量孢子体，考虑真菌感染。为明确诊断，刘主任立即下达医嘱，加做免疫荧光真菌染色，因冰冻诊断具时限性(30分钟内需出具报告)，技术组组长农雪萍迅速进行组织切片及免疫真菌荧光染色，在2分钟内制作出组织免疫荧光片。刘主任在荧光显微镜下即刻诊断，真菌孢子体在荧光显微镜下栩栩如生，病理最终诊断呼之欲出：真菌感染性肉芽肿性炎，符合新型隐球菌感染，快速、准确地为临床提供了明确的诊断。

病理是一门形态科学。随着科学技术的不断发展，病理医生可以通过多种手段去证实病理形态，这正是病理学科的进步——让形态指引诊断方向，用证据来明确诊断。北京协和医院病理科钟定荣教授说：“这是进步的表现，病理诊断的手段越多，诊断的准确性就会越高。”